1. 唾液收集前，为什么要用清水漱口?

因为口腔中的食物残渣、细菌、色素等杂物会污染要收集的唾液，而用清水漱口，可以降低这些杂物的污染，特别是口腔的细菌，如果大量细菌存在，在提纯的人体gDNA中，会有大量细菌DNA的污染，而影响提纯的人体DNA质量。

2. 在清水漱口后，为什么还要等大约30分钟才采集唾液？

口腔中的唾液主要来源于口腔中三大唾液腺体的分泌。在清水漱口后，口腔中的原唾液随着漱口而丢失。而新的唾液产生， 需要唾液腺体重新分泌产生新的分泌物，而这个过程一般是需要30分钟。所以，在清水漱口后，大约等30分钟才采集唾液，就可以得到大量新鲜唾液。

3. 在清水漱口后，采集唾液前30分钟等待时间里，有什么特别要求？口腔有唾液怎么办？

在等待的30分钟里，不要进食，不要喝水，保持口腔卫生即可。可以做任何其它活动。如口腔有唾液， 可以咽下或者吐出。

4. 唾液（saliva）和 痰 （sputum，phlegm）的区别？采集唾液时，为什么要尽量减少痰的污染？

唾液（saliva）是口腔内唾液腺分泌的无色且稀薄的液体，在食物的消化过程中起到非常重要的作用；痰（Sputum，Phlegm）是呼吸道分泌的粘液，主要是保护呼吸道，对抗各种病原体的感染，但呼吸道有炎症时，就会产生大量的浓痰，根据感染的病原体的不同，可能会有不同颜色的浓痰，如黄浓痰、绿痰、铁锈色痰、白色泡沫状痰。这些痰中含有血白细胞、大量细菌、坏死组织、细胞碎片和粘稠的各种糖蛋白，这种粘稠的痰会影响唾液DNA的提纯，特别是痰中的糖蛋白含有大量蛋白质二硫键（Di-sulfated bond），使其粘度增加，成胶质状，而一般蛋白酶K的裂解，不能打断蛋白质二硫键，需要二硫苏糖醇（ dithiothreitol）裂解，才能使痰液化。这些因素，都会造成唾液DNA提纯困难，或者增加提纯步骤。所以，在收集唾液时，要尽量减少痰的污染，方便唾液DNA的提纯。

5. 在提纯唾液DNA时，如何排除微生物细菌DNA的影响？

在用我们推荐的方法采集唾液时，口腔微生物细菌的DNA因为量会非常少，一般不会影响下游的测序实验。根据美国公司多年客户的反馈，测序没有出现问题。

如果是常规测序，因为测序引物自身的特异性，引物不会与细菌的DNA片段结合，所以没有影响；如果是引物的特异性不高，可能会与细菌的DNA片段非特异性结合了，此时，可以对要测序的DNA片段先用PCR扩增，再测序，也可以排除影响。

6. 如果口腔没有唾液，用什么方法刺激口腔，可以产生唾液，方便唾液的收集？

如果口腔干涩，可以将少量的柠檬汁或者盐放在舌尖或者舌头背部刺激口腔，产生唾液，也可同时按摩面颊部位，增加唾液的产生。

7. 为什么要使用昌美生物的唾液收集瓶和唾液保存液？可以直接用冻存的新鲜唾液来提纯DNA吗？

昌美生物的唾液收集瓶和唾液保存液，是我们公司开发的专利产品，为获得高质量、高产量的纯化DNA提供有力保障，使唾液DNA能替代血液DNA完成各种基因医学检查。由于我们的独特的设计，在收集过程中，受检测人员不会接触到任何化学物质，可以让受检测人员非常容易、安全、方便收集唾液。唾液收集瓶可以在学校、幼儿园、家里、办公室及其他偏远地区安全使用，也可以在室温下邮寄收集的唾液。当受检测的唾液和唾液保存液在收集瓶内混合后，根据我们实验证明，唾液DNA可以在室温下至少保存3年，保持其完整性良好，没有任何降解，提纯的gDNA可以用于下游的各种DNA分子检测实验。更重要的是，昌美的唾液保存液，在保存gDNA的同时，可以灭活在唾液中可能污染的各种病原体，使实验人员避免各种疾病的传染， 保护实验人员。

如果将收集到的新鲜唾液，马上（不超过30 分钟）在-20℃下冰冻起来，也可以提纯到人体gDNA。但由于受检测人员的健康状态不明，受检测唾液中可能会含有各种传染因子： 如结核杆菌、肺炎链球菌和流感嗜血杆菌、流感病毒以及其它真菌、病毒等病原体。实验人员在处理这些病原体没有灭活的唾液时，可能从这些污染的唾液中感染这些病原体。所以，我们建议，使用我们的唾液保存液，在保存人体唾液gDNA同时，灭活唾液中可能含有的各种病原体，就可以避免这些问题，保护实验人员的健康！